Izjemne prednosti ultrasenzitivnega ELISA testa z cikliranjem Thio-NAD pri določanju proteina NS1 za dengo
1. Uvod
Denga mrzlica je akutna nalezljiva bolezen, ki jo povzročaVirus denge zaradi ugriza okužene vrste Aedes (Ae. aegypti ali Ae. albopictus),z glavnimi simptomi, kot so visoka vročina, omotica, glavobol, izpuščaj inhudo bolečine (bolečine v očeh, mišicah, sklepih ali kosteh) itd. Ta bolezen je zelo razširjena v tropskih in subtropskih podnebjih. Ocenjuje se, da se vsako leto okuži med 100 in 400 milijoni ljudi, pri čemer je več kot 80 % običajno blagih in brez simptomov. Kljub temu lahko huda denga mrzlica poveča tveganje za smrt, če se ne zdravi ustrezno. Zato je zgodnja diagnoza te bolezni pomembna za njeno pravočasno zdravljenje.Pomembno je, da se nestrukturni protein 1 (NS1), močno ohranjen glikoprotein, predvsem izloča med okužboDengaVirus, ki je intenzivno obravnavan kot glavni patogenezni faktorDenga mrzlica. Zato se NSI običajno uporablja kot biomarker za zgodnje odkrivanje te bolezni.
V tej študiji je bil priložen imunosorbentni test, vezan na encim sendvič (ELISA) v kombinaciji zthio nikotinamid adenin dinukleotid (thio-NAD/S-NAD)Metoda kolesarjenja (v nadaljevanju imenovano ultrasenzitivna ELISA) se uporablja za zaznavanje NSI, sledi primerjava z NAAT za potrditev natančnosti zaznavanja.
2. Prednosti in slabosti tradicionalnih metod zaznavanja zaDenga mrzlica
Trenutno je tTukaj so štiri glavne metode zaznavanjaza Denga mrzlica.
Izolacija virusa in identifikacija je zelo specifična, vendar zamudna in traja vsaj 5 dni. The Hitri antigen Test je najhitrejši in stroškovno najbolj učinkovit med drugimi metodami, vendar občutljivost in specifičnosti so razmeroma nizke. Serološki test, ki temelji na IgM in IgG, je omejen z število dni okužbe, kottheTest je treba prestaviti do nivoja protiteles Doseže zaznavno raven.
V kliniki se pogosto uporablja NAAT za določanjeDenga mrzlica zaradi umazanije zaradi visoke občutljivosti in specifičnosti. Vendar je ta metoda draga, naporna in nagnjena k lažnim pozitivnostim, ki jih mora izvajati usposobljeno osebje.Da bi premagali slabosti teh metod, je bila uvedena nova metoda zaznavanjaultrasenzitivna ELISA je uporabljeno v tej študiji.
3. Potek dela ultrasenzitivnega ELISA z cikliranjem thio-NAD
Par protitelesje uporablja se za zajem proteina NS1 v sendvič ELISA in alkalne fosfatazeje označeno na sekundarnem protitelesu. Poleg protiteles obstajajo derivat androsterona, 3α-hidroksisteroid dehidrogenaza, tio-NAD in NADHso uporablja se za konstrukcijo cikelnega sistema encimov thio-NAD. Med ciklično reakcijo tio-NAD se je tio-NADH nenehno kopičil v trikotnem številu in ga je bilo mogoče neposredno izmeriti pri absorpciji 405 nm.
4. Primerjava ultrasenzitivnih ELISA in NAAT pri zaznavanju proteina Denga NS1
V NAAT je 60 primerkov pozitivnih na dengue, 25 pa negativnih. Vrednost NAAT ciklnega praga (CT) za te vzorce, pozitivne na dengue, je bila med 12,42 in 31,41.Pri ultrasenzitivnem ELISA testu je 59 vzorcev ustrezno pozitivnih na rezultate NAAT, medtem ko je 25 vzorcev popolnoma negativnih na rezultate NAAT.V primerjavi z NAAT sta občutljivost in specifičnost ultrasenzitivnega ELISA 98,3 % oziroma 100 % (Tabela 2). Od 60 pacientov, potrjenih z NAAT, pozitivnih na dengo, je le 1 vzorec negativen na ultrasenzitivni ELISA. Podatki NAAT so pokazali, da je vzorec primer okužbe tipa 4 DENV z vrednostjo CT 21,59. Rezultati ultrasenzitivnega ELISA testa so skoraj popolnoma usklajeni z rezultati NAAT, s kappa vrednostjo 0,972 (95 % IZ: 0,917-1.0).
5. Zaključek
UMetoda ltrasensitivne ELISA je enostavna za izvedbo in za operacijo ne zahteva strokovnih pripravnikov. THE detekcija se lahko začne takoj po prejemu majhnega vzorca. Še posebej je primeren za zgodnje odkrivanjeDengabolezen v Države z nizkimi dohodki.Viri
Chen, Po-Kai et al. "Napredna metoda zaznavanja proteina Denga NS1 z uporabo ultrasenzitivnega ELISA z cikliranjem Thio-NAD." Virusi, letnik 15,9, 1894. 8. september 2023, doi:10.3390/v15091894Prednosti in značilnosti izdelkaBONTAC Thio-NAD/S-NAD
BONTAC je oNe izmed redkih podjetij vKitajska ki lahko proizvede Thio-NAD, z"Bonzyme" Celencimska metoda (okolju prijazno; Brez škodljivih ostankov topil) in edinstvena "Bonpure" sedemstopenjska tehnologija čiščenja. BONTAC prepleta raziskave in razvoj, proizvodnjo ter prodajo z samostojne tovarne in številne mednarodne certifikate za zagotavljanje visoke kakovosti in stabilne dobave izdelkov.
