Znanstvena metoda za kvantificiranje NMN v bioloških vzorcih
1. Uvod
DopolnitevNikotinamid mononukleotid (NMN)za povečanje regulacijeRaven odNikotinamid adenin dinukleotid (NAD+)je bil predstavljen kot obetavna intervencija proti staranju. Vendar pa je še vedno resen izziv za natančnokvantificiraj vmesne vrednosti NAD+, NMN Še posebej. Ta študija ima pooblastilo za uvedbo nove metode, dvojno izotopsko posredovane LC-MS/MS metodologije (dimeLC-MS/MS), za natančno kvantifikacijoNMN v bioloških vzorcih.2. Dejavniki, ki vplivajo na natančno zaznavanje NMN
NMN je težko natančno zaznati zaradi njegove občutljivosti na encimske učinkerazgradnja, pretvorba pri obdelavi vzorcev, njeno kompleksno vedenje v različnih pogojih kolone in ekstrakcije, pa tudi učinek matrike.
Natančneje, NMN ima lastnosti visoke polaritete in nizke hlapnosti, ki jo je enostavno raztopiti v vodi, a jo je težko raztopiti v organskih topilih. Te lastnosti močno omejujejo uporabo številnih konvencionalnih metod kvantitativne analize.
BJološki vzorcina primer kri nosi pomembne aktivnosti CD38 in CD73 (ekto-5’-nukleotidaza), oba bi lahko uporabljala NMN kot substrat.
Obnašanje NMN v koloni je zelo zapleteno, verjetno zaradi bipartitne narave njegovih nabojev, zato subtilne razlike v ekstrakciji in pogojih kolone pomembno vplivajo na zanesljivo in natančno zaznavanje NMN.
3. Strategije spoprijemanjadimeLC-MS/MS za zmanjšanje vpliva faktorjev vpliva
Da bi se izognili motnjam zgoraj omenjenih dejavnikov, je pRototipStolpecNMN-2 se uporablja. Ta kolumnavsebujes Visokočisti silicijevi delci na osnovi C18 ki so bolj sposobni vezati hidrofilne spojine kot ogljikove delce, kar izboljšuje sposobnost ločevanja.PErkloricna kislina (PCA) se uporablja, saj lahko učinkovito izvleči NAD+ in NMN iz bioloških vzorcev, kot je plazma, z minimalno Izgube.
Za prilagoditev matrikskih učinkov,a Fiksna količina (1 μM) vsakega Izotopska spojinais dodano kBiološki vzorce pred ekstrakcijo PCA.
4. Prednosts dimeLC-MS/MS
Dizotopski NMN standardi, NMN (M + 14) in NMN (M + 5) lahko v metodologiji, ki jo vodi LC-MS/MS, natančno sledita usodi NMN med obdelavo vzorcev, kipomembno poveča natančnost in zanesljivost merjenja NMN v bioloških vzorcih. Poleg tega lahko dimeLC-MS/MS oceni učinkovitost ekstrakcije in absolutne koncentracije NMN v različnih vrstah bioloških vzorcev.
5. Zaključek
Thje novi LC-MS/MS-vodena metodologija z dvojnimi izotopskimi NMN standardi lahko accurately in Reliably merite NMN v bioloških vzorcih. Uporablja se lahko za prihodnje študije o vnosu NMN.6. Viri
Unno, Junya et al. "Absolutna kvantifikacija mononukleotida nikotinamida v bioloških vzorcih z dvojno izotopno posredovano tekočo kromatografijo-tandemsko masno spektrometrijo (dimeLC-MS/MS)." npj Staranje, letnik 10,1 2. 2. januar 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Zakaj izbratiBONTAC?
BONTACje vodja globalnegaNMNindustrijo. Imamo prvo tehnologijo katalize s celimi encimi na Kitajskem in smo postali vodilno podjetje na tem področju Koencimski izdelki, ki se široko uporabljajo v zdravstveni industriji, medicini in lepoti, zeleno kmetijstvo, biomedicino in druga področja. Omeniti velja,BONTAC je NMNDobavitelj surovin za znano ekipo Davida Sinclaira na Harvard University. Naše storitve in izdelki so zanesljivi. Poleg tega,BONTACimaNeodvisniKoencim Raziskovalni center za inženirsko tehnologijo na pokrajinski ravni na Kitajskem ter lastne tovarne, kjer je mogoče zagotoviti čistost in stabilnost izdelkov.
