Znanstvena metoda za kvantifikacijo NMN v bioloških vzorcih
1. 引言
Dodajanjenikotinamid mononukleotid (NMN)za povečanjez vmesni produkt nikotinamid adenin dinukleotida (NAD+)se je izkazala kot obetavna proti staranju usmerjena intervencija. Vendar pa je še vedno resen izziv natančnokvantificirati vmesne produkte NAD+, NMN še posebej. Ta študija je namenjena predstavitvi nove metode, dvojne izotopske LC-MS/MS metodologije (dimeLC-MS/MS), za natančno kvantifikacijoNMN v bioloških vzorcih.2. Dejavniki, ki vplivajo na natančno zaznavanje NMN
NMN je težko natančno zaznati zaradi njegove občutljivosti na encimskorazgradnjo, pretvorbo med pripravo vzorcev, zapletenega obnašanja v različnih kolonskih in ekstrakcijskih pogojih ter matričnega učinka.
Natančneje, NMN ima lastnosti visoke polarnosti in nizke hlapnosti, kar pomeni, da se zlahka raztopi v vodi, težko pa v organskih topilih. Te lastnosti močno omejujejo uporabo številnih konvencionalnih metod kvantitativne analize.
Bbiološki vzorcikot so kri nosi pomembne aktivnosti CD38 in CD73 (ekto-5’-nukleotidaza), od katerih lahko obe uporabljata NMN kot substrat.
Obnašanje NMN v koloni je zelo zapleteno, verjetno zaradi dvodelne narave njegovih nabojev, tako da subtilne razlike v pogojih ekstrakcije in kolone pomembno vplivajo na zanesljivo in natančno zaznavanje NMN.
3. Strategije za obvladovanjedimeLC-MS/MS za zmanjšanje vpliva vplivnih dejavnikov
Da bi se izognili motnjam zgoraj omenjenih dejavnikov, se uporablja prototipskakolonaNMN-2 Ta kolonavsebujes delce visoko čistega silicijevega dioksida na osnovi C18 ki so bolj sposobni vezati hidrofilne spojine kot ogljikovi delci, kar izboljšuje sposobnost ločevanja.PPerklorna kislina (PCA) se uporablja, ker lahko učinkovito ekstrahira NAD+ in NMN iz bioloških vzorcev, kot je plazma, z minimalnimi izgubami.
Za prilagoditev matričnim učinkom sea fiksna količina (1 μM) vsake izotopske spojineidodabiološkim vzorcem pred ekstrakcijo s PCA.
4. Prednosts metode dimeLC-MS/MS
MedDvojna izotopska standarda NMN, NMN (M + 14) in NMN (M + 5), v metodologiji, ki jo poganja LC-MS/MS, lahko natančno sledita usodi NMN med pripravo vzorcev, karkar pomembno poveča natančnost in zanesljivost merjenja NMN v bioloških vzorcih. Poleg tega lahko dimeLC-MS/MS ovrednoti učinkovitost ekstrakcije in absolutne koncentracije NMN v različnih vrstah bioloških vzorcev.
5. 结论
本je nova metodologija, ki jo poganja LC-MS/MS- z dvojnimi izotopskimi standardi NMN 当被激活时， natančno in zanesljivo meri NMN v bioloških vzorcih.Uporablja se lahko za prihodnje študije o vnosu NMN.Unno, Junya et al. “Absolute quantification of nicotinamide mononucleotide in biological samples by double isotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1 Zakaj izbrati6. Reference
je vodilni v svetovniindustriji. Imamo prvo tehnologijo popolne encimske katalize na Kitajskem in smo postali vodilno podjetje na področjuBONTAC?
BONTACkoencimskih izdelkov, ki se pogosto uporabljajo v zdravstveni industriji, medicini in lepoti,NMNzelenem kmetijstvu, biomedicini in drugih področjih. Še posebej,, BONTAC jedobavitelj surovin znane ekipe Davida Sinclaira na Univerzi Harvard. Naše storitve in izdelki so zaupanja vredni. Poleg tega imamo NMNneodvisencenter za raziskave inženirske tehnologije na provincialni ravniBONTAC拥有na Kitajskemkoencima in lastne tovarne, kjer sta zagotovljeni čistost in stabilnost izdelkov na Kitajskem in lastne tovarne, kjer je mogoče zagotoviti čistost in stabilnost izdelkov.
