Znanstvena metoda za kvantifikacijo NMN v bioloških vzorcih
1. Uvod
Dopolnjevanje nikotinamid mononukleotid (NMN) za povečanje ravni nikotinamid adenin dinukleotida (NAD +) je bil razkrit kot obetavna intervencija proti staranju. Vendar je natančna količinska opredelitev vmesnih izdelkov NAD + še vedno resen izziv, NMN zlasti. Ta študija je namenjena uvedbi nove metode, dvojno izotopsko posredovane metodologije LC-MS/MS (dimeLC-MS/MS), za natančno kvantifikacijo NMN v bioloških vzorcih.
2. Dejavniki, ki vplivajo na natančno odkrivanje NMN
NMN je težko natančno odkriti zaradi njegove ranljivosti za encimsko razgradnjo, pretvorbo v obdelavi vzorcev, zapletenega vedenja v različnih pogojih kolone in ekstrakcije ter učinka matrike.
Natančneje, NMN ima lastnosti visoke polarnosti in nizke hlapnosti, ki se zlahka raztopi v vodi, vendar se težko raztopi v organskih topilih. Te lastnosti močno omejujejo uporabo številnih konvencionalnih metod kvantitativne analize.
BIološki vzorci kot sokri nosi pomembne aktivnosti CD38 in CD73 (ecto-5’-nukleotidaza), ki bi lahko uporabljala NMN kot substrat.
Obnašanje NMN v koloni je zelo zapleteno, verjetno zaradi dvodelne narave njegovih nabojev, tako da subtilne razlike v pogojih ekstrakcije in kolone pomembno vplivajo na zanesljivo in natančno zaznavanje NMN.
3. Strategije obvladovanja dimeLC-MS/MSzmanjšati vpliv dejavnikov vpliva
Da bi se izognili motnjam zgoraj omenjenih dejavnikov, se uporabi prototipni stolpec NMN-2. Ta kolona vsebuje delce silicijevega dioksida visoke čistosti na osnovi C18, ki so bolj sposobni vezati hidrofilne spojine kot delci ogljika, kar izboljša sposobnost ločevanja.
Uporablja se perklorna kislina (PCA), saj lahko učinkovito ekstrahira NAD + in NMN iz bioloških vzorcev, kot je plazma, z minimalnimi izgubami.
Za prilagoditev učinkom matriksa se biološkim vzorcem pred ekstrakcijo PCA doda fiksna količina (1 μM) vsake izotopske spojine.
4. Prednostsod dimeLC-MS/MS
Dvojni izotopski standardi NMN, NMN (M + 14) in NMN (M + 5), v metodologiji, ki jo poganja LC-MS/MS, lahko natančno sledijo usodi NMN med obdelavo vzorcev, kar bistveno poveča natančnost in zanesljivost merjenja NMN v bioloških vzorcih. Poleg tega lahko dimeLC-MS/MS oceni učinkovitost ekstrakcije in absolutne koncentracije NMN v različnih vrstah bioloških vzorcev.
5. Zaključek
ThJenovi LC-MS/MS-Metodologija z dvojnimi izotopskimi standardi NMN lahko natančno in zanesljivo izmeri NMN v bioloških vzorcih.Uporablja se lahko za prihodnje študije o vnosu NMN.
6. Sklic
Unno, Junya et al. "Absolutna kvantifikacija nikotinamidnega mononukleotida v bioloških vzorcih z dvojno izotopsko posredovano tekočinsko kromatografijo-tandemsko masno spektrometrijo (dimeLC-MS/MS)." npj aging vol. 10,1 2. 2. januar 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Zakaj izbrati BONTAC?
BONTAC je vodilna na svetovni ravni NMN industrija. Imamo prvo tehnologijo katalize s celotnimi encimi na Kitajskem in smo postali vodilno podjetje v koencimskih izdelkih, ki se pogosto uporabljajo v zdravstveni industriji, medicini in lepoti, zelenem kmetijstvu, biomedicini in drugih področjih. Predvsem je BONTAC NMN dobavitelj surovin slavne ekipe Davida Sinclaira na Univerzi Harvard. Naše storitve in izdelki so zaupanja vredni. Poleg tega BONTAC ima neodvisen raziskovalni center za tehnologijo koencimskega inženiringa na ravni pokrajin na Kitajskem in tovarne v lasti, kjer je mogoče zagotoviti čistost in stabilnost izdelkov.
Disclaimer
ThJe Članek jena podlagi sklicevanje vakademska revija. Ustrezne informacije so Zagotoviti samo za namene skupne rabe in učenja in ne predstavlja nobenih medicinskih nasvetov. Če pride do kršitve, prosimo, StikAvtor zaIzbrišiion. Stališča, izražena v tem članku, ne predstavljajo stališča BONTAC.